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  • 該如何儲存胎牛血清看完本篇你就知道了

  • 點選次數│◕:30 釋出時間│◕:【2022-07-20】
  •   在細胞培養過程中↟◕,經常加入5%-20%的胎牛血清↟◕,常使用的胎牛血清濃度是10%✘·。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜↟◕,影響後續實驗的結果↟◕,我們在實驗中使用10%的胎牛血清培養293T細胞↟◕,效果非常好✘·。
     
      但是有些細胞也會使用5%的或者20%胎牛血清↟◕,要根據具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度✘·。
     
      那麼我們該如何儲存胎牛血清呢?下面讓我們一起來了解一下吧✘·。
     
      1₪◕◕、需要長期儲存的血清必須儲存於-20℃-70℃低溫冰箱中✘·。4℃冰箱中儲存時間切勿超過1個月✘·。切勿將血清在37℃放置太久↟◕,否則血清會變得渾濁↟◕,同時血清中的有效成分會被破壞↟◕,而影響血清質量✘·。如果一次無法用完一瓶↟◕,可將40~45ml分裝於無菌50ml離心管中✘·。
     
      由於血清結冰時體積會增加約10%↟◕,因此↟◕,血清在凍入低溫冰箱前↟◕,必須預留一定體積空間↟◕,否則易發生汙染或玻璃瓶凍裂✘·。
     
      2₪◕◕、一般廠商提供的血清為無菌↟◕,無需再過濾除菌✘·。如發現血清有懸浮物↟◕,則可將血清加入培養液內一起過濾↟◕,切勿直接過濾血清✘·。
     
      3₪◕◕、瓶裝血清解凍需採用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然後移入室溫↟◕,待全部溶解後再分裝↟◕,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml✘·。
     
      在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)↟◕,使溫度與成分均一↟◕,減少沈澱的發生✘·。
     
      切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍↟◕,這樣因溫度改變太大↟◕,容易造成蛋白質凝集而出現沉澱✘·。
     
      4₪◕◕、熱滅活是指56℃↟◕,30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須↟◕,一般不建議作此熱處理↟◕,因為熱處理會造成血清沉澱物顯著增多↟◕,而且還會影響血清的質量✘·。
     
      補體參與反應有:細胞毒作用↟◕,平滑肌細胞收縮↟◕,肥大細胞和血小板釋放組胺↟◕,增強吞噬作用↟◕,促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化✘·。
     
      5₪◕◕、血清中的沉澱物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍後血清中纖維蛋白造成↟◕,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm↟◕,5分鐘去除↟◕,也可不用處理✘·。顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清↟◕,沉澱物的形成會顯著增多✘·。有些沉澱物在顯微鏡下觀察象"小黑點"↟◕,常誤認為血清受汙染✘·。一般情況下↟◕,此小黑點不會影響細胞生長↟◕,但如果懷疑血清質量↟◕,則應立即停止使用↟◕,更換另一批號的血清✘·。
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